MIF慢病毒含myc标签
慢病毒感染快速指南 1. 将目的细胞按 30%汇合度接种到 24 孔板，约 3-5×104细胞数/孔，不同细胞因为细胞大 小不同细胞数量会不同，快速指南以细胞数量为 5×104为例，加入 500uL 完全培养基进行 细胞培养。 2. 接种后 12-20h 感染阴性对照慢病毒（接种细胞至病毒感染细胞时间不宜太长，否则细胞 增殖影响细胞密度不利用后期抗性筛选）。 3.加病毒量计算方法：（细胞数×MOI 值/病毒滴度）×103=病毒量（uL），加病毒量见下表。 同时加入 Polybrene，每孔加 0.25uL，浓度为 10mg/mL Polybrene，细胞培养液中终浓度为 5ug/mL。 病毒液滴度 （TU/mL） MOI=10 （uL） MOI=20 （uL） MOI=40 （uL） MOI=80 （uL） MOI=100 （uL） 4×108TU/mL 1.25uL 2.5uL 5uL 10uL 12.5ul 4.感染 16-20h 后更换培养基，弃去培养基，每孔加入 500uL 新鲜的培养基。 5.感染后 48-96h 显微镜观察荧光。（注：如果 48h-96h 期间细胞汇合度达到 100%，请及时 传代培养） 6.建议将 48 孔板细胞进行传代，传代 12 孔板，后继续观察荧光，根据细胞状态和荧光细 胞比例综合判断细胞感染佳 MOI 值。一般选择细胞生长良好，感染效率 80%左右的感染 条件作为佳感染条件。（注：100%荧光感染不一定为细胞佳 MOI 值，因为可能会造成 细胞慢病毒感染拷贝数太高，影响细胞状态） 更新时间：2023/12/22 16:13:04
标签：MIF慢病毒含myc标签 |
技术支持：阿仪网， 总访问量：4623211
