HPV16E7慢病毒含HA标签
慢病毒的储存及稀释
慢病毒对端温差敏感。 反复冻融和长期暴露于环境温度将降低功能性慢病毒滴度。 本公司提供的慢病毒为50- 100 µ LI管， 一假不需要分装。 如果有分装的需要， 收到病毒后立刻于冰上使用预冷的离心管分装病毒（此时可以留存大 于35 µ L用于病毒感染的MOI预实验）。 分装后病毒应存储于－80℃冰箱中。 慢病毒颗粒子－80℃可储存12个月， － 20℃储存2个月， 4℃储存一周。 根据本公司的实验结果显示， 在储存期限内， 储存于－20℃的慢病毒未显示出明显的滴度 降低现象， 但仍然强烈建议用户将慢病毒储存于－80℃中。 根据实验需要， 可使用预冷的完全培养基或PBS稀释慢病毒颗粒， 稀释于冰上解冻， 并且实验全程请将病毒颗粒 置于冰上， 避免过长时间暴露于环境温度中；本公司使用配置的病毒冻存液保存病毒， 因此稀释后的慢病毒请立即使用， 不建议再次冻存 .辅助试剂的选择 Polybrene可以促进病毒对细胞的侵染， 但在少数情况下它对细胞有伤害。 有的细胞对Polybrene的毒理 反应明显， 因此细胞感染时是否适合Polyb「ene需要摸索；不同细胞对Polybrene的敏感度不同， 可以用 1 ～ 10 µ g/ml的范围筛选合适的浓度， 以24h 内细胞无明显毒性反应为佳， 过长时间暴露于Polybrene可对某些 细胞产生毒性作用。 可参考文献并进行预实验摸索， Polybrene常用的工作浓度为6 ～ 8 µ g/ml。 一般我们推 荐使用浓度为8 µ g/ml。如果细胞 MOI 值比较低或者对感染效率要求不高， 建议不加任何感染辅助试剂。 更新时间：2023/12/27 9:31:53
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