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ELISA实验标本收集注意事项

阅读人数:1288 发布时间:2018/4/16 21:40:53

  ELISA实验中,如何收取好样本,也是实验中一个必不可少的重要步骤,需要注意事项:

1)在做ELISA 方案时,收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。

 

2)我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后及时进行检测。1-3天左右检测的样本可储存在4℃备用。如有特殊原因需要周期性收集标本,请将标本及时分装后放在-20℃- 70℃条件下保存,避免反复冻融。

 

二、ELISA实验液体类标本:

包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

 

1)血清:

室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

 

2)血浆:

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

 

3)尿液:

用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

 

4)细胞培养上清:

A、检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000分)。仔细收集上清。

 

B、检测细胞内的成份时,用PBSPH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并 放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

 

5)组织标本:

切割标本后,称取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

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